Test z genetyki.pdf

imię i nazwisko:

nr kodu: LABGEN 70

grupa .........................................

Proszę zapamiętać swój nr kodu !!! W wynikach kolokwium nie będą podane nazwiska tylko numery k odów !!!

Wyniki na stronie www.dnagda.com/labgen.html

Laboratorium z genetyki i inżynierii genetycznej – test wyboru 2005

Proszę postawić znak X w kwadracie obok prawidłowej odpowiedzi. Tylko jedna odpowiedź jest prawidłowa .

SKALA OCEN

92-100%

bdb (5,0)

28-30 pkt.

☺

84-92%

pdb (4,5)

26-27 pkt.

76-84%

db (4,0)

23-25 pkt.

68-76%

ddb (3,5)

21-22 pkt.

60-68%

dst (3,0)

18-20 pkt.

0-60%

ndst (2,0)

0-17 pkt

1. Wodorotlenek sodowy stosowany w izolacji plazmidowego DNA metodą lizy alkalicznej

⌧

a) powoduje lizę komórek oraz denaturację DNA

b) powoduje lizę komórek i denaturację DNA plazmidowego, ale nie denaturuje DNA chromosomalnego

c) powoduje lizę komórek oraz renaturację DNA

d) podwyższa pH, przez co zabezpiecza DNA przed denaturacją

2. Która odpowiedź jest FAŁSZYWA:

a) Sole chaotropowe, jak np. chlorowodorek guanidyny denaturują białka.

b) Sole chaotropowe, jak np. rodanek guanidyny denaturują białka.

c) Sole chaotropowe, jak np. chlorowodorek guanidyny powodują precypitację DNA na dnie plastikowej probówki.

d) Sole chaotropowe, jak np. chlorowodorek guanidyny ułatwiają wiązanie DNA z krzemionką.

3. Aby przygotować 100 ml 8 M roztworu chlorowodorku guanidyny należy

a) odważyć 0,8 mola chlorowodorku guanidyny i rozpuścić w 100 ml wody

b) odważyć 0,8 mola chlorowodorku guanidyny i dodać wody do 100 ml

c) odważyć 8 moli chlorowodorku guanidyny i rozpuścić w 1000 ml wody, po czym podzielić na porcje 100 ml

d) odważyć 8 moli chlorowodorku guanidyny i dodać wody do 100 ml

4. Zadaniem kwaśnego roztworu octanu potasu stosowanego w izolacji plazmidowego DNA jest :

a) wytrącenie białek

b) degradacja białek

c) wytrącenie DNA plazmidowego

d) rozpuszczenie białek

5. Triton X-100 to detergent niejonowy, który w niskim stężeniu (np. 0,1%)

a) ułatwia działanie wielu enzymów, gdyż powoduje denaturację białek

b) ułatwia działanie wielu enzymów, gdyż zapobiega agregacji białek

c) ułatwia działanie wielu enzymów, gdyż sprzyja agregacji białek

d) utrudnia działanie polimerazy DNA, gdyż zapobiega agregacji białek

6. Co wyróżnia wektory spośród innych fragmentów DNA

a) kolista forma

b) liniowa forma

c) możliwość replikacji w komórkach biorcy

d) możliwość trawienia enzymem restrykcyjnym w wybranym miejscu

7. W stężonym buforze dodawanym do mieszaniny reakcyjnej PCR odpowiednią siłę jonową zapewnia przede wszystkim

a) MgCl 2 w stężeniu 50 M

b) KCl w stężeniu 500 mM

c) KCl w stężeniu 50 mM

d) MgCl 2 w stężeniu 5 mM

8. Wybierz bufor do PCR, który należy dodać do reakcji w objętości równej dziesiątej części objętości końcowej

a) 100 mM Tris-HCl (pH 8.8, 25°C), 500 mM KCl, 1% Triton X-100, HgCl 2 (50 mM)

b) 10 mM Tris-HCl (pH 8.8, 25°C), 50 mM KCl, 0,1% Triton X-100, MgSO 4 (5 mM)

c) 100 mM Tris-HCl (pH 8.8, 25°C), 500 mM KCl, 1% Triton X-100, MgCl 2 (50 mM)

d) 100 mM Tris-HCl (pH 8.8, 25°C), 500 mM KCl, 1% Triton X-100, MgSO 4 (50 mM), 100 mM EDTA (zabezpiecza przed nukleazami)

9. W celu analizy produktów PCR o wielkości około 500 pz metodą elektroforezy agarozowej należy przygotować żel

a) przez zagotowanie 5 g żółtej, czeskiej agarozy w 50 ml wody

b) przez rozpuszczenie 0,5 g agarozy w 50 ml buforu do elektroforezy

c) przez rozpuszczenie 1,0 g agarozy w 50 ml buforu do elektroforezy stężonego 10 razy

d) przez rozpuszczenie 1,0 g agarozy w 50 ml buforu do elektroforezy

10. Na podstawie analizy elektroforetycznej w żelu agarozowym nie można

a) oszacować ilości DNA

b) rozróżnić plazmidu liniowego od superskręconego

c) odczytać sekwencji nukleotydowej DNA

d) oszacować rozmiaru DNA

⌧

11. Enzymy restrykcyjne

⌧ a) trawią DNA w obrębie swojej sekwencji rozpoznania lub w jej sąsiedztwie

b) trawią DNA wyłącznie w obrębie swojej sekwencji rozpoznania

c) trawią DNA wyłącznie w sąsiedztwie swojej sekwencji rozpoznania

d) trawią DNA w obrębie swojej sekwencji rozpoznania lub w jej sąsiedztwie, ale w odległości nie mniejszej niż 10 pz od końców fragmentu DNA

12. Doaktywności endonukleaz restrykcyjnych

⌧ a) niezbędne są jony magnezowe

b) niezbędny jest magnez

c) niezbędny jest DTT

d) niezbędne są jony chlorkowe

13. Ditiotreitol (DTT) jest stosowany w buforach do enzymów restrykcyjnych, gdyż

a) zabezpiecza DNA przed utlenieniem

b) powoduje redukcję mostków disiarczkowych enzymu

c) chelatując jony magnezowe zabezpiecza DNA przed nukleazami

⌧ d) zabezpiecza grupy tiolowe enzymów przed utlenieniem

14. Student i Studentka zabawiali się trawieniem plazmidowego DNA przy pomocy endonukleazy restrykcyjnej Eco RI do formy liniowej, z tym że Studentka zapomniała

dodać enzymu, buforu i nie pami

ętała, na którą ścieżkę naniosła przygotowywane przez siebie DNA. Czy

możecie Państwo pomóc Studentce i wskazać, która to

może być ścieżka?

a) 1 lub 2

b) 1 lub 4

⌧ c) 3 lub 4

d) 1 lub 3

1 2 3 4

Kierunek migracji DNA

15. Enzymy restrykcyjne klasy IIS, czyli shiftery

a) mają te same sekwencje rozpoznania, ale różne nazwy

⌧ b) trawią DNA poza swoją sekwencją rozpoznania

c) rozpoznają wyłącznie sekwencje palindromiczne

d) mają różne sekwencje rozpoznania, ale te same nazwy

16. Ktomiał szanse na większą liczbę klonów z insertami: czy Student, który klonował fragment restrykcyjny uzyskany przez trawienie enzymem Eco RV (GAT^ATC)

do unikalnego miejsca restrykcyjnego Sma I (CCC^GGG), czy Studentka, która klonowała fragment uzyskany przez trawienie enzymem Bgl II (A^GATCT) do

miejsca Bam HI (G^GATCC)?

a) Studentka, gdyż fragmenty DNA trawione przez Studenta różnymi enzymami restrykcyjnymi nie mogą zostać zligowane.

⌧ b) Studentka, gdyż fragmenty DNA o tępych końcach ligowane są mniej wydajnie niż fragmenty o kompatybilnych końcach lepkich.

c) Student, gdyż w klonowaniu wykonywanym przez Studentkę w ogóle nie mogła zajść ligacja.

d) Student, gdyż ligacja DNA o końcach tępych jest bardziej wydajna niż ligacja DNA o kompatybilnych końcach lepkich.

17. Ktouzyskał klony z insertami: czy Student, która klonował produkt PCR trawiony enzymem Bsp DI (AT^CGAT) do wektora potrawionego do formy liniowej

enzymem Cla I (AT^CGAT), czy Studentka, która klonowała produkt PCR potrawiony enzymem Sma I (CCC^GGG) do miejsca Xma I (C^CCGGG)?

a) Studentka, gdyż fragmenty DNA trawione przez Studenta różnymi enzymami restrykcyjnymi nie mogą zostać zligowane.

b) Studentka, gdyż fragmenty DNA o kompatybilnych lepkich końcach ligowane są wydajniej niż fragmenty o końcach tępych.

⌧ c) Student, gdyż w fragmenty DNA w doświadczeniu wykonywanym przez Studentkę w ogóle nie mogły zostać zligowane.

d) Student, gdyż ligowane przez niego fragmenty DNA nie były ufosforylowane na końcach 5’.

18. Ktouzyskał większą liczbę fragmentów DNA: Student, który otrzymał 10 µ g produktu PCR o wielkości 300 pz, czy Studentka, która otrzymała 5 µ g DNA o wielkości

100 pz ?

⌧ a) Studentka

b) Student

c) uzyskali tę samą liczbę fragmentów

d) Student, ale nie można tego racjonalnie uzasadnić

19. Czymożna wklonować gen do jednego wektora dwóch częściach, tak żeby był czynny (np. jeden fragment zawiera sekwencje wiązania rybosomów i kodon start,

drugi pozostałe kodony)?

⌧ a) tak

b) można wklonować, ale gen nie będzie aktywny, bo nie można go precyzyjnie połączyć

c) nie, bo nie można zapewnić wzajemnej orientacji tych fragmentów

d) tak, ale nie można zapewnić wzajemnej orientacji tych fragmentów

20. W celu uzyskania wydajnej ekspresji genu NIE należy klonować

⌧ a) w miejsce Bgl II

b) w miejsce Bam HI

c) np. w miejsce Nde I

d) pomiędzy miejsca Hin dIII- Xho I

21. Wersenian dwusodowy, czyli EDTA

⌧

a) umożliwia działanie enzymów restrykcyjnych

b) zabezpiecza DNA przed nukleazami, gdyż chelatuje jony magnezowe - ich kofaktory

c) zabezpiecza DNA przed nukleazami, gdyż chelatuje jony chlorkowe - ich kofaktory

d) zabezpiecza RNA przed nukleazami, gdyż chelatuje jony chlorkowe - ich kofaktory

22. MetylacjaDNA

a) blokuje działanie wszystkich enzymów restrykcyjnych

b) indukuje działanie wszystkich enzymów restrykcyjnych, jeżeli metylacja ma miejsce w obrębie sekwencji rozpoznania

c) nie ma wpływu na działanie żadnego z enzymów restrykcyjnych, jeżeli metylacja ma miejsce w obrębie sekwencji rozpoznania

d) może blokować działanie niektórych enzymów restrykcyjnych, jeżeli metylacja ma miejsce w obrębie sekwencji rozpoznania

23. Która sekwencja NIE jest palindromiczna?

a) CATATG

b) GGTACC

c) GTTAAG

d) TTAA

24. Wybierzodpowiedź FAŁSZYWĄ: ligaza DNA faga T4 łączy dwa fragmenty DNA

a) pod warunkiem, że końce 3’ obydwu fragmentów są ufosforylowane i jest obecne ATP

b) pod warunkiem, że końce 5’ przynajmniej jednego z tych fragmentów są ufosforylowane

c) pod warunkiem, że jest obecne ATP

d) pod warunkiem, że są to fragmenty DNA o końcach tępych lub kompatybilnych końcach lepkich

25. Jakprzygotować komórki kompetentne?

a) przez 30 s inkubację w lodzie, w roztworze chlorku wapnia

b) przez inkubację w 42 ° C, w roztworze chlorku wapnia

c) przez kilkugodzinną inkubację w lodzie, w roztworze ATP

d) przez kilkugodzinną inkubację w lodzie, w roztworze chlorku wapnia

26. Efektywność wprowadzenia DNA do komórek E. coli w procesie transformacji

a) zależy od rozmiaru i ilości DNA oraz szczepu bakterii

b) jest bardzo niska w wypadku metylowanego DNA

c) jest bardzo niska w wypadku niemetylowanego DNA

d) jest wyższa dla plazmidu potrawionego do formy liniowej

27. Bromek etydyny

a) tworzy z DNA silnie fluoryzujące kompleksy

b) fluoryzuje równie silnie wolny i w kompleksach z DNA

c) barwi DNA na niebiesko

d) jest powszechnie stosowany do wybarwiania żeli białkowych

28. Bakteria z plazmidem niosącym czynny gen oporności na kanamycynę

a) może tworzyć kolonie na podłożu nie zawierającym antybiotyków

b) nie tworzy kolonii na podłożu nie zawierającym kanamycyny

c) tworzy kolonie wyłącznie na podłożu zawierającym kanamycynę

d) nie może tworzyć kolonii na podłożu nie zawierającym antybiotyków

29. Po wklonowaniu insertu 2000 pz do wektora o wielkości 4000 pz, plazmidy rekombinantowe można wyselekcjonować

a) gdyż inserty migrują w żelu agarozowym szybciej niż wektor

b) gdyż migrują w żelu agarozowym wolniej niż wektor

c) gdyż migrują w żelu agarozowym w postaci dwóch prążków: 4000 i 2000 pz.

d) gdyż migrują w żelu agarozowym na wysokości fragmentu restrykcyjnego o wielkości 6000 pz

30. Wydajna ekspresja genu będącego pod kontrolą promotora T7

a) nie zależy od szczepu E. coli , który jest gospodarzem, wymaga tylko dodania IPTG

b) wymaga szczepu E. coli z genem polimerazy DNA faga T7 oraz dodania IPTG

c) wymaga szczepu E. coli z genem polimerazy RNA faga T7 oraz dodania IPTG

d) wymaga szczepu E. coli z sekwencją wiązania rybosomów faga T7, ale nie wymaga dodania IPTG

Coś za coś, czyli zamiast odpowiedzi na 2 z 30 powyższych pytań proszę udzielić odpowiedzi na 2 poniższe.

A. (zamiast pytania nr .............).Jeżeli średnia masa cząsteczkowa 1 pz wynosi 666 g/mol, a produkt PCR ma rozmiar 300 pz, to 2,0 µ g produktu PCR zawiera ?

⌧

a) 10 -11 mola (10 pmoli) cząsteczek DNA

b) 10 -12 mola (1 pmol) cząsteczek DNA

c) 10 -6 mola (1 µ mol) cząsteczek DNA

d) 1 mol cząsteczek DNA

B. (zamiast pytania nr .............).Ile 1 µ l startera o stężeniu 10 µ M należy dodać do reakcji PCR, aby mieszanina reakcyjna o objętości 50 µ l zawierała 25 pmoli startera?

a) 2,5 µ l

b) 2 µ l

c) dodawać stopniowo mieszając subtelnymi ruchami nadgarstka

d) w ogóle nie trzeba dodawać

⌧

Plik z chomika:

Inne pliki z tego folderu:

Inne foldery tego chomika: