Karolina Lipiec
Przemysław Podsiadlik
Grupa 2
Ochrona Środowiska
Wyznaczanie kinetyki procesów enzymatycznych poprzez pomiar szybkości zużycia tlenu przez mikroorganizmy
Aktywność oddechowa drożdży
Opracowanie wyników:
Objętość r-ru substratu wprowadzona do naczynia pomiarowego [ml]
Stężenie substratu w naczyniu pomiarowym
S [mg/l]
Aktywność oddechowa podstawowa AOp [mg O2/dm3*h]
Aktywność oddechowa z glukozą
AOg [mg O2/dm3*h]
AO = AOp - AOg
1/S
1/AO
1
0,91
21,84
4,00
3,95
1,098901
0,25
2
1,82
20,22
4,67
4,62
0,549451
0,22
3
2,73
35,00
3,33
3,30
0,3663
0,30
4
3,64
18,00
0,67
0,61
0,274725
1,64
5
4,55
33,00
2,33
2,30
0,21978
0,43
Wzór obliczenia stężenia substratu S [mg / l] :
A g – 110ml
x - 1000 ml
x =
Wzór obliczenia aktywność oddechowej :
Korzystaliśmy z szybkości przesuwu [cm/min] i z ilość zużytego tlenu [mg/l]
Aktywność podstawowa, czyli zero glukozy:
B cm - 1 min
C cm - x
AOg – AOp = AO
Wartość Km:
0 = 0,0092* (-1/Km) + 0,0373
-1/Km = -0,0373 / 0,0092 = - 4,05
Km = -1 / -4,05 = 0,25 [mg/dm3]
Wartość AOmax:
1/AOmax = 0,0373
AOmax = 1/0,0373
AOmax = 26,81 [mg O2/dm3*h]
Wnioski:
Szybkość maksymalna wyniosła 26,81, a Km wyniosło 0,25. Punkt przecięcia rzutu wartości Km nie przecina się z wykresem przedstawiającym Kinetykę I-rzędu, a powinno tak być według teorii Michaelisa-Menten. Może to być spowodowane błędami w wykonaniu ćwiczenia (niewłaściwej obsłudze rejestratora i sondy tlenowej, dostaniem się tlenu do naczyńka pomiarowego), błędami w obliczeniach lub nieoptymalnymi warunkami życiowymi drożdży (zbyt wysoka/niska temperatura…). Zgadza się natomiast twierdzenie teorii M-M, że przy pewnej określonej wartości stężenia aktywność oddechowa (prędkość reakcji enzymatycznej) przestaje zależeć od stężenia – zbliża się do wartości prędkości maksymalnej jednak nie jest to już zależność liniowa.
peroni69