Metody oznaczania autoAb.pdf
(
1108 KB
)
Pobierz
Metody oznaczania autoAb
METODY OZNACZANIA
PRZECIWCIA
METODY OZNACZANIA
AUTOIMMUNIZACJA
PRZECIWCIAÿ
AUTOLOGICZNYCH
AUTOLOGICZNYCH
ad immunologiczny rozpoznaje
wszystkie
epitopy
nawet na kom
nawet na komó
rkach w
rkach wł
asnych
asnych
CHOROBY
AUTOIMMUNIZACYJNE
CHOROBY
Wię
kszo
kszo
ść
ść
tych komponent
tych komponentó
w to potencjalne
w to potencjalne
autoimmunogeny
zdolne do wzbudzania
zdolne do wzbudzania
AUTOIMMUNIZACYJNE
odpowiedzi komó
rkowej lub humoralnej
rkowej lub humoralnej
Proces tworzenia odpowiedzi immunologicznej
przeciw w
mgr Magdalena Kujawiak
Zakład Laboratoryjnej Immunologii Medycznej
Uniwersytet Medyczny w Łodzi
AUTOIMMUNIZACJA (autoagresja)
W zjawisku autoimmunizacji uczestniczą:
Zespół mechanizmów, dzięki którym mimo
potencjału autoimmunizacyjnego nie dochodzi do
aktywacji komórek autoreaktywnych i do
patologicznej odpowiedzi z niszczeniem struktur
organizmu, nazywamy AUTOTOLERANCJĄ.
- autoantygeny (na prawidłowych komórkach i
wewnątrz nich, rozpoznawane przez limfocyty T i B)
- autoreaktywne limfocyty T
- autoreaktywne limfocyty B
-
przeciwciała autologiczne
(mogą powodować
niszczenie tkanek i narządów)
Tolerancja immunologiczna jest zabezpieczeniem
przed rozwojem proces
przed rozwojem procesó
w
w
autoimmunizacyjnych
autoimmunizacyjnych.
MECHANIZMY TOLOERANCJI IMMUNOLOGICZNEJ:
Tolerancja centralna tzw.
delecja
delecja
centralna
centralna
(
elimincja
elimincja
CIĄŻA
autoreaktywnych
klon
klonó
w limfocyt
w limfocytó
w T w grasicy i limfocyt
w T w grasicy i limfocytó
w B w
w B w
szpiku kostnym o duż
ym powinowactwie do antygen
ym powinowactwie do antygenó
w w
w wł
asnych)
asnych)
Tolerancja obwodowa
: niedopuszczenie do pobudzenia
: niedopuszczenie do pobudzenia
autoreaktywnych
limfocyt
limfocytó
w T nieusuni
w T nieusunię
tych w grasicy lub
tych w grasicy lub
•
W tym szczególnym okresie układ immunologiczny jest mniej czujny.
zniszczenie tych, któ
re uleg
re uległ
y aktywacji (do tych reakcji nale
y aktywacji (do tych reakcji nale
żą
żą
delecja
klonalna
klonalna
,
,
apoptoza
apoptoza
tych kom
tych komó
rek)
rek)
• Nie zwalcza obcych tkanek, np. plemników czy płodu.
= ignorancja antygenu:
-
sekwestracja anatomiczna np. ochrona przez szczelny
• Przypuszcza się, że dzięki temu objawy niektórych chorób (np. RZS -
reumatoidalnego zapalenia stawów) łagodnieją, a innych (np. tocznia)
nasilają się.
sekwestracja anatomiczna np. ochrona przez szczelny
śró
db
sekwestracja molekularna ( „-”
produkcja
produkcja
cytokin
cytokin
IFN, TNF)
IFN, TNF)
• Prawdopodobnie to skutek interakcji, jakie zachodzą między
hormonami płciowymi (estrogenami i progesteronem) a tzw. limfocytami
T oraz wahań stężenia tych komórek we krwi, do jakich dochodzi w
różnych okresach ciąży
Aktywna
supresja
supresja
: kom
: komó
rki T regulatorowe ( tzw.
rki T regulatorowe ( tzw.
supresorowe
supresorowe
),
),
tworzą
IL
IL-
10, TGF
10, TGF-B
1
Nasz ukł
ad immunologiczny rozpoznaje
Û
Nasz uk
wszystkie
epitopy
Û
Wi
autoimmunogeny
odpowiedzi kom
Û
Proces tworzenia odpowiedzi immunologicznej
przeciw wł
asnym antygenom to
asnym antygenom to
AUTOIMMUNIZACJA (autoagresja)
Tolerancja immunologiczna jest zabezpieczeniem
Tolerancja centralna tzw.
autoreaktywnych
szpiku kostnym o du
Tolerancja obwodowa
autoreaktywnych
zniszczenie tych, kt
delecja
Sekwestracja
= ignorancja antygenu:
Sekwestracja
onek
-
sekwestracja molekularna (
dbł
onek
Aktywna
tworz
amania tolerancji immunologicznej rozwija się
choroba autoimmunizacyjna
, b
, będą
ca stanem
Choroby
autoimmunizacyjne
autoimmunizacyjne
uk
ukł
adowe (narz
adowe (narzą
dowo
dowo-
rym dochodzi do zaatakowania struktur
organizmu i niszczenia ich w procesie nieprawid
nieswoiste)
to choroby przewlek
to choroby przewlekł
e, do kt
e, do któ
rych
rych
organizmu i niszczenia ich w procesie nieprawidł
owo
owo
zaliczamy:
przebiegają
cej odpowiedzi immunologicznej.
cej odpowiedzi immunologicznej.
-
choroby reumatyczne
choroby reumatyczne
tj. reumatoidalne zapalenie
tj. reumatoidalne zapalenie
stawó
w, m
w, mł
odzie
odzień
cze zapalenie staw
cze zapalenie stawó
w, tocze
w, toczeń
Przykłady chorób autoimmunologicznych:
¶
celiakia
¶
cukrzyca typu 1
¶
toczeń układowy
¶
zespół Sjögrena
¶
stwardnienie rozsiane
¶
choroba Hashimoto
¶
choroba Graves-Basedowa
¶
trombocytopenia samoistna
¶
reumatoidalne zapalenie stawów
ukł
adowy, zesp
adowy, zespół
Sjoegrena
Sjoegrena
,
,
twardzina
twardzina
ograniczona i
ograniczona i
ukł
adowa, zapalenie
adowa, zapalenie
wielomi
wielomi
ęś
ęś
niowe
niowe
/sk
/skó
rno
rno-
mi
mi
ęś
ęś
niowe,
niowe,
zespół
antyfosfolipidowy
antyfosfolipidowy
-
zapalenia naczy
zapalenia naczyń
tj. mikroskopowe zapalenie
tj. mikroskopowe zapalenie
naczyń
, guzkowe zapalenie t
, guzkowe zapalenie tę
tnic, zesp
tnic, zespół
Kawasaki
Kawasaki
,
,
ziarniniak
Wegenera
Wegenera
REUMATOIDALNE ZAPALENIE STAWÓW (RZS) = gościec
Choroba Hashimoto, Graves-Basedowa, nowotwory tarczycy
przeciwciała anty TG (przeciwciała przeciw tyreoglobulinie)
uszkadzają komórki tarczycy na drodze zależnej od przeciwciał
cytotoksyczności komórkowej.
- przewlekła choroba zapalna
- rozpoczyna się od zapalenia błony maziowej stawu i prowadzi do
zapalenia stawów, kaletek maziowych i pochewek ścięgnistych
- w przebiegu przewlekłego stanu zapalnego błona maziowa ulega
pogrubieniu oraz tworzy liczne fałdy. Dochodzi do niszczenia
chrząstki, torebki stawowej, więzadeł i trwałego zniekształcenia
stawów
- mogą występować objawy ze strony innych narządów
- należy do układowych chorób tkanki łącznej
- określono predyspozycję genetyczną
- powstają m.in. autoprzeciwciała przeciw fragmentowi FcIgG,
- dochodzi do uwolnienia enzymów agresywnych wobec chrząstki
stawowej (kolagenazy, elastazy)
Cukrzyca typu I
najczęstszą z chorób autoimmunologicznych
dotyka 1 na 20 osób
celem ataku są komórki trzustki produkujące insulinę
Stwardnienie rozsiane (SM)
choruje jedna na tysiąc osób, trzy razy częściej kobiety
układ odpornościowy uznaje za wroga mózg i rdzeń kręgowy,
niszczy osłonki włókien nerwowych, a w ich miejscu tworzy się
stwardnienie (blizna)
TOCZEŃ UKŁADOWY RUMIENIOWATY
(systemic lupus erythematosus - SLE)
Do czynników etiologicznych zaliczamy
:
-
- rozwija się na tle złożonych i niejasnych zaburzeń układu odpornościowego,
prowadzacych do procesu zapalnego wielu tkanek i narządów
- zachorowalność szacuje się na 40–50 przypadków na 100tys.
- 10-krotnie częściej chorują kobiety i szczyt zachorowań występuje w wieku
16–55 lat
- przez dłuższy czas mogą dominować objawy z jednego narządu, a w miarę
trwania choroby mogą pojawiać się objawy z kolejnych narządów
- zwykle wykrywa się:
• Ab przeciw dsDNA (natywne
DNA)
• Ab anty-Sm
• Ab przeciwjądrowe (ANA)
predyspozycje genetyczne (haplotypy HLA kl. I i II: A1,
B8, B27, DR1, DR2, DR3, DQw1, DQw6 )
-
czynniki środowiskowe (infekcje wirusowe, bakteryjne,
leki, oleje toksyczne)
DIAGNOSTYKA LABORATORYJNA:
I. badanie ogólne krwi, OB, CRP, stężenie w surowicy
składowych dopełniacza C3, C4 i ich produktów C3d, a
także poziom IgG w surowicy
II. oznaczanie w materiale z biopsji kompleksów, złogów
immunologicznych
2
W momencie za
W momencie zał
amania tolerancji immunologicznej rozwija si
ca stanem
Choroby
nieswoiste)
patologicznym, w kt
patologicznym, w któ
rym dochodzi do zaatakowania struktur
przebiegaj
staw
uk
uk
zesp
naczy
ziarniniak
III. Oznaczanie autoprzeciwciał w surowicy krwi
skierowane przeciwko:
¦
antygenom powszechnie wyst
mogą
by
być
skierowane przeciwko:
1. Badanie screeningowe, wstępne, podstawowe,
przesiewowe,
metodą immunofluorescencji
pośredniej
- Ocena jakościowa obecności autoprzeciwciał i
zaszeregowanie ich do określonego rodzaju
antygenom powszechnie wystę
puj
pują
cym w organizmie
cym w organizmie
gospodarza w tkankach i
narzadach
narzadach
(Ag j
(Ag ją
drowe
drowe-
DNA,
histony
histony
, RNA)
, RNA)
¦
antygenom swoistym tylko dla okre
antygenom swoistym tylko dla okreś
lonej tkanki (Ag
lonej tkanki (Ag
2. Badanie potwierdzające,
metodą blot lub ELISA
- Ocena jakiściowa pozwalająca określić swoistość
autoprzeciwciał
tarczycowy-
tyreoglobina
tyreoglobina)
Najważniejsze badanie dodatkowe w diagnostyce chorób
autoimmunizacyjnych, gdzie dominuje odpowiedź
humoralna
3. Badanie ilościowe,
metodą ELISA
- Oznaczanie ważne w monitorowaniu przebiegu choroby
np. tocznia układowego (Ab anty-dsDNA)
TECHNIKĘ
IIF WYKORZYSTUJE SI
IIF WYKORZYSTUJE SIĘ
DO OZNACZANIA:
DO OZNACZANIA:
-
przeciwcia
przeciwciał
przeciwj
przeciwją
drowych
drowych
(ANA)
(ANA)
-
przeciwcia
przeciwciał
przeciwneutrofilowych
przeciwneutrofilowych
(ANCA)
(ANCA)
-
przeciwcia
przeciwciał
przeciwsercowych
przeciwsercowych
(AHA)
(AHA)
-
przeciwcia
przeciwciał
przeciwmitochondrialnych
przeciwmitochondrialnych
(AMA)
(AMA)
-
przeciwcia
przeciwciał
przeciwko mi
przeciwko mi
ęś
ęś
niom g
niom gł
adki
adki
m (ASMA)
m (ASMA)
- wą
trobowo
trobowo-
nerkowych Ab
nerkowych Ab
przeciwmikrosomalnych
przeciwmikrosomalnych
(anty
(anty-
LKM
LKM-
1)
1)
-
przeciwcia
przeciwciał
przeciwko rozpuszczalnym antygenom w
przeciwko rozpuszczalnym antygenom wą
troby
troby
SLA)
-
przeciwcia
(anty-
SLA)
przeciwciał
reaguj
reagują
cych z antygenami w
cych z antygenami wą
troby i trzustki (LP)
troby i trzustki (LP)
-
przeciwcia
przeciwciał
a przeciwko w
a przeciwko wą
trobowo
trobowo-
specyficznym antygenom
specyficznym antygenom
bł
onowym (anty
onowym (anty-
LSP)
LSP)
METODY
IMMUNOFLUORESCENCYJNE
METODY
-
przeciwcia
przeciwciał
przeciwko receptorowi
przeciwko receptorowi
asialoglikoproteinowemu
asialoglikoproteinowemu
ASGPR)
-
przeciwcia
(anty-
ASGPR)
(anty
IMMUNOFLUORESCENCYJNE
przeciwciał
a przeciwko dehydrogenazie alkoholowej (ADH)
a przeciwko dehydrogenazie alkoholowej (ADH) -
u
u
dzieci
IMMUNOFLUORESCENCJA
PRZYGOTOWANIE MATERIAŁ
U DO BADA
U DO BADAŃ
Zastosowana pierwszy raz w latach 40’
XX wieku
XX wieku
Technika
immunofluorescencyjna
immunofluorescencyjna
nie
nie
do wykrywania Ag
pneumokokowego
pneumokokowego
w tkankach.
w tkankach.
wymaga utrwalania materiał
u,
u,
y,
przygotowywany do dalszej procedury
materiał ś
wie
wież
y,
przygotowywany do dalszej procedury
jedynie przez zamra
Do dziś
to warto
to wartoś
ciowa metoda diagnostyczna w
ciowa metoda diagnostyczna w
jedynie przez zamraż
anie.
anie.
chorobach o podłoż
u immunologicznym. Charakteryzuje
u immunologicznym. Charakteryzuje
się
wysok
wysoką
czu
czułoś
ci
cią
i swoisto
i swoistoś
ci
cią.
Istotą
reakcji jest wi
reakcji jest wią
zanie Ag z
zanie Ag z
Ab
Ab
wyznakowanym
wyznakowanym
fluorochromem.
ciej stanowią
wycinki tkankowe, pobrane podczas
do badań
najcz
najcz
ęś
ęś
ciej stanowi
wycinki tkankowe, pobrane podczas
biopsji, rzadziej rozmazy z
liwia uwidocznienie poszukiwanych Ag w skrawkach
tkankowych oceniaj
biopsji, rzadziej rozmazy z
aspiratu
aspiratu
pobranego drogą
punkcji
punkcji
cienkoig
cienkoigł
owej
owej
.
.
tkankowych oceniają
c je w mikroskopie fluorescencyjnym,
c je w mikroskopie fluorescencyjnym,
posiadają
cym specjalne filtry przepuszczaj
cym specjalne filtry przepuszczają
ce wi
ce wią
zk
zkę
wiatł
a niezb
a niezbę
dna do wzbudzenia
dna do wzbudzenia
fluorochromu
fluorochromu
.
.
3
Autoprzeciwcia
Autoprzeciwciała
mog
gospodarza w tkankach i
DNA,
tarczycowy
TECHNIK
(anty
PRZYGOTOWANIE MATERIA
Û
Zastosowana pierwszy raz w latach 40
Û
Technika
wymaga utrwalania materia
do wykrywania Ag
opracowuje si
opracowuje się
materia
Û
Do dzi
chorobach o pod
si
Û
Istot
Û
Materia
Materiał
do bada
fluorochromem
Û
To umo
To umoż
liwia uwidocznienie poszukiwanych Ag w skrawkach
pobranego drog
posiadaj
ś
wiat
POSTĘ
POWANIE Z MATERIA
POWANIE Z MATERIAŁ
EM TKANKOWYM
EM TKANKOWYM
NIEUTRWALONYM
EM
TKANKOWYM NIEUTRWALONYM
POWANIE Z MATERIAŁ
EM
NIEUTRWALONYM
TKANKOWYM NIEUTRWALONYM
1.
1.
Bioptat
/wycinek umieszcza si
/wycinek umieszcza się
na
na
stoliku kriostatu tj.
mikrotonu
mikrotonu
, kt
, któ
ry
ry
Skrawki wykonuje się
po uprzednim po
po uprzednim położ
eniu
eniu
bioptatu
bioptatu
w uchwycie i
w uchwycie i
po
łą
łą
czony jest z zamra
czony jest z zamraż
ark
arką
,
,
odczekaniu kilkunastu minut.
na uzyskanie
temperatury przynajmniej
temperatury przynajmniej -
20
20
°
C.
C.
Skrawki o gruboś
ci ok. 4
ci ok. 4-
6 mikron
6 mikronó
w umieszcza si
w umieszcza się
na szkie
na szkieł
kach
kach
podstawowych pokrytych substancją
zabezpieczaj
zabezpieczającą
przed
przed
2.
2.
Tkankę
pokrywa si
pokrywa się
specjalnym
specjalnym
odklejeniem i utrwala mieszaniną
alkoholu z acetonem.
alkoholu z acetonem.
ynem o duż
ej g
ej gę
sto
stoś
ci (
ci (
Tissue
Tissue-
Tek
Tek
)
)
a nastę
pnie zamra
pnie zamraż
a tzw. mieszanin
a tzw. mieszaniną
Owinię
te foli
te folią
aluminiow
aluminiową
szkie
szkieł
ka mo
ka moż
na przechowywa
na przechowywać
w temp.
w temp.-
20
20
°
C
C
zamraż
aj
ającą
(aceton, suchy l
(aceton, suchy ló
d, ciek
d, ciekł
y
y
zamra
nawet do pół
roku.
roku.
azot) oraz pł
ynem ozi
ynem ozię
biaj
biają
cym. Takie
cym. Takie
enie chroni
przed zniszczeniem struktury tkanki.
przed zniszczeniem struktury tkanki.
3.
3.
Tak przygotowany materiał
mo
moż
na
na
przechowywać
w zamra
w zamraż
arce w temp.
arce w temp.
70
°
C przez wiele miesi
C przez wiele miesię
cy.
cy.
Û
Stosuje si
Stosuje się
dwa warianty
dwa warianty
metody immunofluorescencji (IF):
metody immunofluorescencji (IF):
KONTROLE
Testy
przy pomocy
znakowanych fluorescencyjnie przeciwcia
IF bezpoś
rednie
rednie
wykrywaj
wykrywają
przy pomocy
znakowanych fluorescencyjnie przeciwciał
okre
okreś
lony antygen.
lony antygen.
Û
Nale
Należ
y pami
y pamię
ta
tać
o
o
autofluorescencji
autofluorescencji
kom
komó
rek (nieswoiste
rek (nieswoiste
ś
wiecenie).
wiecenie).
Testy
Testy
IF po
IF poś
rednie
rednie
wykrywaj
wykrywają
przy pomocy znakowanych
przy pomocy znakowanych
fluorescencyjnie przeciwciał
immunoglobuliny, kt
immunoglobuliny, któ
re
re
Û
W kontroli negatywnej zamiast Ab podczas wykonywania
W kontroli negatywnej zamiast Ab podczas wykonywania
badania dodaje si
uprzednio zwią
za
zał
y si
y się
ze swoistym antygenem.
ze swoistym antygenem.
badania dodaje się
surowic
surowicę
normaln
normalną
,
,
zwi
zwię
rz
rzęcą.
Û
Trzeba tak
Trzeba takż
e wykona
e wykonać
kontrol
kontrolę
pozytywn
pozytywną
w tkance o
w tkance o
znanej ekspresji Ag.
Û
Prawid
owo wykonane kontrole (dodatnia i ujemna)
zmniejszaj
zmniejszają
prawdopodobie
prawdopodobień
stwo uzyskania wynik
stwo uzyskania wynikó
w
w
fał
szywie dodatnich i fa
szywie dodatnich i fał
szywie ujemnych.
szywie ujemnych.
METODA IMMUNOFLUORESCENCJI
BEZPO
METODA IMMUNOFLUORESCENCJI
METODA IMMUNOFLUORESCENCJI
PO
BEZPOŚ
REDNIEJ
REDNIEJ
POŚ
REDNIEJ
REDNIEJ
direct
immunofluorescence
immunofluorescence -
DIF)
DIF)
(
indirect
indirect
immunofluorescence
immunofluorescence -
IIF)
IIF)
jednostopniowa, najprostsza
Û
prowadzimy tylko jedn
Dwustopniowa:
1 faza
skrawka z wyznakowanym
fluorochromem Ab skierowanym przeciwko konkretnemu Ag
inkubację
skrawka z wyznakowanym
1 faza-
wi
wią
zanie
zanie
nieznakowanego
nieznakowanego
Ab z
Ab z
fluorochromem Ab skierowanym przeciwko konkretnemu Ag
Û
oceniamy pod mikroskopem fluorescencyjnym czy jest
poszukiwanym Ag
2 faza
oceniamy pod mikroskopem fluorescencyjnym czy jest ś
wiecenie
wiecenie
2 faza-
wi
wią
zanie Ab znakowanego (Ab wt
zanie Ab znakowanego (Ab wtó
rnego)
rnego)
(barwa zależ
nie od rodzaju
nie od rodzaju
fluorochromu
fluorochromu
), czyli czy w skrawku obecne
), czyli czy w skrawku obecne
z Ab
nieznakowanym
nieznakowanym
(Ab pierwotnym), kt
(Ab pierwotnym), któ
re
re
poszukiwane Ag
Û
stosowana do wykrywania Ag wirusowych, bakteryjnych,
uprzednio zd
ąż
ążył
o ju
o już
zwi
zwią
za
zać
si
się
z Ag
z Ag
stosowana do wykrywania Ag wirusowych, bakteryjnych,
paso
pasoż
ytniczych i nowotworowych
ytniczych i nowotworowych
liwia wzmocnienie reakcji
immunologicznej, co pozwala na zmniejszenie t
immunologicznej, co pozwala na zmniejszenie tł
a
a
reakcji a dzię
ki temu otrzymanie czytelniejszego
ki temu otrzymanie czytelniejszego
obrazu.
Û
Stosowana do wykrywania
Stosowana do wykrywania
Ab
Ab.
Preparaty: np. skrawki wą
troby/serca szczura,
troby/serca szczura,
utrwalone komó
rki Hep
rki Hep-
2 (kom
2 (komó
rki raka krtani
rki raka krtani
bogate w antygeny)
4
POST
POST
POSTĘ
POWANIE Z MATERIA
Bioptat
Û
Skrawki wykonuje si
stoliku kriostatu tj.
po
pozwalaj
pozwalającą
na uzyskanie
Û
Skrawki o grubo
podstawowych pokrytych substancj
Tkank
odklejeniem i utrwala mieszanin
pł
ynem o du
a nast
Û
Owini
nawet do p
azot) oraz p
bł
yskawiczne zamro
yskawiczne zamroż
enie chroni
Tak przygotowany materia
przechowywa
-
70
KONTROLE
Testy
IF bezpo
fluorescencyjnie przeciwcia
uprzednio zwi
Prawidł
owo wykonane kontrole (dodatnia i ujemna)
fa
METODA IMMUNOFLUORESCENCJI
(
direct
Û
jednostopniowa, najprostsza
Û
Dwustopniowa:
prowadzimy tylko jedną
inkubacj
poszukiwanym Ag
(barwa zale
z Ab
są
poszukiwane Ag
uprzednio zd
Û
Metoda ta umo
Metoda ta umoż
liwia wzmocnienie reakcji
reakcji a dzi
obrazu.
Û
Preparaty: np. skrawki w
utrwalone kom
PODSTAWOWE TYPY ŚWIECENIA
w metodzie IF
POŚREDNIEJ OZNACZANIA PRZECIWCIAŁ
anty- JĄDROWYCH:
Pośrednia immunoflorescencja
Wzory barwienia immunofluorescencyjnego w diagnostyce przeciwciał
przeciwjądrowych
• Homogenny
• Brzeżny
• Plamisty
• Jąderkowy
obwodowa
homogenna
Typy pośrednie
:
• Centromerowy
• Drobnoplamisty
• Homogenno-brzeżny
centromerowa
jąderkowa
plamista
COLORZYME
METODYKA DWUBARWNA I TRÓ
JBARWNA
JBARWNA
Û
pochodna metody
pochodna metody
immunofluorescencyjnej
immunofluorescencyjnej
, w kt
, w któ
rej wyeliminowano
rej wyeliminowano
liwia wykrycie kilku Ag w jednym skrawku
Û
stosuje si
konieczno
ść
ść
stosowania
stosowania ś
wiat
wiatł
a UV
a UV
stosuje się
Ab znakowane r
Ab znakowane róż
nymi
nymi
fluorochromami
fluorochromami
o odmiennych
o odmiennych
barwach
Û
wykorzystywana g
Û
stosuje si
stosuje się
konjugaty
konjugaty
antyglobulin
antyglobulin
z
z
peroksydaz
peroksydazą
chrzanow
chrzanową
(HRP)
(HRP)
wykorzystywana głó
wnie w technice immunofluorescencji po
wnie w technice immunofluorescencji poś
redniej
redniej
oraz nowych substrató
w, co umo
w, co umoż
liwi
liwił
o zwi
o zwię
kszenie dok
kszenie dokł
adno
adnoś
ci
ci
szczegółó
w struktury kom
w struktury komó
rkowej na obrazie mikroskopowym
rkowej na obrazie mikroskopowym
ANCA (
Anti
Anti-
Neutrophil
Neutrophil
Cell
Cell
Antibody
Antibody)
ANCA c.d.
W wielu chorobach tj. ziarniniak
Wegenera
Wegenera
, guzkowe zapalenie naczy
, guzkowe zapalenie naczyń
,
,
Zależ
nie od typu
nie od typu ś
wiecenia mo
wiecenia moż
na wyr
na wyróż
ni
nić:
choroba
Kawasaki
Kawasaki
, opisane zosta
, opisane został
y przeciwcia
y przeciwciał
a skierowane przeciwko
a skierowane przeciwko
C-
ANCA
ANCA
cytoplazmatyczny, anty
cytoplazmatyczny, anty-
PR
PR-3
śró
db
dbł
onkom naczy
onkom naczyń.
MPO (MPO ma dodatni
ł
adunek, a podczas utrwalania alkoholem zostaje uwolniona z
P-
ANCA
ANCA
oko
okoł
oj
oją
drowy
drowy
, anty
, anty-
MPO (MPO ma dodatni
adunek, a podczas utrwalania alkoholem zostaje uwolniona z
granul do cytoplazmy i przyci
Nie jest znany antygen przeciw któ
remu Ab powstaj
remu Ab powstają
, jako
, jako
granul do cytoplazmy i przycią
gana do j
gana do ją
dra kom
dra komó
rki, kt
rki, któ
rego
rego
prawdopodobne uważ
a si
a się
zmodyfikowane, nieprawid
zmodyfikowane, nieprawidł
owe cz
owe czą
steczki
steczki
DNA ma ł
adunek ujemny)
adunek ujemny)
adhezyjne wystę
puj
pują
ce na powierzchni kom
ce na powierzchni komó
rek
rek śró
db
dbł
onka
onka
A-
ANCA
ANCA
atypowy
atypowy
naczyniowego.
Te Ab mogą
aktywowa
aktywować
uk
ukł
ad dope
ad dopeł
niacza oraz bra
niacza oraz brać
udzia
udział
w procesie
w procesie
ADCC (cytotoksyczno
ść
ść
zale
zależ
na od przeciwcia
na od przeciwciał
).
).
U pacjentó
w z niekt
w z niektó
rymi postaciami zapalenia ma
rymi postaciami zapalenia mał
ych naczy
ych naczyń
wykry
wykryć
na:
-
Ab anty
Ab anty-
proteinaza3 (PR
proteinaza3 (PR-
3) granulocyt
3) granulocytów
Ab
anty
anty-
mieloperoksydaza
mieloperoksydaza
(MPO) granulocyt
(MPO) granulocytów
5
METODYKA DWUBARWNA I TR
Û
umo
umoż
liwia wykrycie kilku Ag w jednym skrawku
konieczno
barwach
oraz nowych substrat
szczeg
ANCA c.d.
ANCA (
Û
W wielu chorobach tj. ziarniniak
Û
Zale
choroba
Û
Nie jest znany antygen przeciw kt
DNA ma
prawdopodobne uwa
adhezyjne wyst
naczyniowego.
Û
Te Ab mog
ADCC (cytotoksyczno
Û
U pacjent
mo
moż
na:
-
Ab
Plik z chomika:
kosmetologia_umed
Inne pliki z tego folderu:
Immunologia_208_pytania.doc
(28 KB)
izolacja, barwienie i roznicowanie komorek ukl. immunologicznego.pdf
(2304 KB)
Metody oceny chemotaksji, fagocytozy..pdf
(1724 KB)
metody oznaczania Ab i dopelniacza.pdf
(1105 KB)
Metody oznaczania autoAb.pdf
(1108 KB)
Inne foldery tego chomika:
CHSK
DERMATOLOGIA
DIETETYKA
EKONOMIKA
FIZYKOTERAPIA I MASAŻ
Zgłoś jeśli
naruszono regulamin