Immunohematologiczne podstawy współczesnej transfuzjologii.pdf

(535 KB) Pobierz
Microsoft PowerPoint - Podstawy immunohenatologii-wykład.ppt
Immunohematologiczne
podstawy współczesnej
transfuzjologii
Immunohematologia
- badania nad antygenami grup krwi i przeciwcia ł ami
dotyczy:
sk ł adników upostaciowanych krwi
-krwinki czerwone
-krwinki bia ł e
-krwinki p ł ytkowe
-bia ł ka osocza
alloprzeciwciałai ich
znaczenie kliniczne
Wa ż niejsze odkrycia w
immunohematologii
Grupa krwi
1901 r.
układ grupowy ABO
Landsteiner
1927 r.
układ MN
Landsteiner i Levine
-dziedziczna cecha powierzchni krwinek czerwonych
wykrywana przez swoiste alloprzeciwcia ł a
1927 r.
układ P
Landsteiner i Levine
-G. Daniels-
1940 r.
układ Rh
Landsteiner i Viener
1945 r.
test antyglobulinowy
Coombs, Maurant i Race
- obecne również na innych komórkach krwi
oraz w innych tkankach
1945 r.
układ Kell
Coombs, Maurant i Race
1988 r.
test mikrokolumnowy w żelu
Lafierre
Wyst ę powanie grup krwi
na tkankach
Struktura antygenów grupowych
Szeroko
rozpowszechnione
Specyficzne tylko dla
krwinek czerwonych
ograniczone
-glikolipidy
-glikoproteiny
ABO
Rh
Diego
osoby grupy O - ł a ń cuch H ( swiosto ść antygenow ą nadaje
ko ń cowy cukier L-fruktoza)
Lutheran
LW
Kidd
Gierbich
Kell
Duffy
Cromer
MNS
Kx
A i B – determinanty antygenowe ró ż ni ą si ę jednym
cukrem
Knops
1
321172071.010.png 321172071.011.png
Schemat budowy biochemicznej antygenów ABO
Przeciwcia ł a grupowe krwi
H
L-Fruktoza
A
-alloprzeciwcia ł a- powstaj ą w odpowiedzi na obce antygeny
-autoprzeciwcia ł a– reaguj ą z antygenami na w ł asnych krwinkach
N-acetyloglukozamina
B
D-galaktoza
Charakterystyka przeciwcia ł grupowych krwi
- immunoglobuliny – syntetyzowane prze limfocyty B
-wyst ę puj ą g ł ównie jako immunoglobuliny klasy M i klasy G
-zdolne do swoistej reakcji serologicznej z antygenem
IgM
IgG
PODSTAWOWE POJĘCIA
PODSTAWOWE POJĘCIA
ALLOPRZECIWCIAŁA ODPORNOŚCIOWE - powstają na skutek
kontaktu z obcymi antygenami grupowymi krwinek, należą do klasy IgG.
PRZECIWCIAŁA NATURALNE -powstają przez kontakt z
antygenami powszechnie występującymi w przyrodzie (są klasy
IgM)
AGLUTYNACJA - Podstawowa reakcja wskaźnikowa
w immunohematologii .
Przebiega dwuetapowo:
PRZECIWCIAŁA NATURALNE REGULARNE p/c do
antygenów układu ABO
W pierwszym etapie /faza uczulenia/ dochodzi do
immunologicznego wiązania przeciwciał z determinantami
antygenowymi krwinki czerwonej.
PRZECIWCIAŁA NATURALNE NIEREGULARNE p/c do
innych układów grupowych MNS, P
W drugim etapie erytrocyty zbliżają się do siebie i tworzą
aglutynaty.
2
321172071.012.png 321172071.013.png 321172071.001.png 321172071.002.png 321172071.003.png 321172071.004.png
PODSTAWOWE DEFINICJE
PODSTAWOWE DEFINICJE
Przeciwciała klasy IgM mające zdolność wywołania reakcji
aglutynacji w środowisku 0,9% roztworu NaCl noszą nazwę
PRZECIWCIAŁ KOMPLETNYCH , gdyż pod ich wpływem reakcja
zachodzi spontanicznie, bez dodatkowych, ułatwiających ją czynności.
cząsteczki IgM są pentamerami mają dużo miejsc wiążących antygen i
stąd wynika ich łatwość wiązania z antygenami, nawet w środowisku
NaCl.
Natomiast przeciwciała klasy IgG noszą nazwę PRZECIWCIAŁ
NIEKOMPLETNYCH tzn nie mogą związać krwinek w aglutynaty bez
stworzenia specjalnych warunków reakcji. Dzieje się tak dlatego, że
błona komórkowa krwinek czerwonych ma stały ujemny ładunek i krwinki
odpychają się, zachowując określoną odległość między sobą. IgG są
zbyt małe /monomer/,by mogły połączyć sąsiadujące ze sobą,
odpychające się krwinki czerwone.
Przeciwciała kompletne są również nazywane PRZECIWCIAŁAMI
TYPU ZIMNEGO ponieważ optimum ich temperatury działania
przypada na temperaturę pokojową i poniżej.
Przeciwciała niekompletne nazywane są również PRZECIWCIAŁA TYPU
CIEPŁEGO reagują optymalnie w temperaturze 37 0 C i zwykle
są to przeciwciała klasy IgG.
PODSTAWOWE DEFINICJE
Dlatego aby uzyskać drugą fazę aglutynacji potrzebne są:
PODSTAWOWE DEFINICJE
substancje wzmacniające reakcję
W wielu przypadkach pomimo zastosowania tych technik nie
można wykryć pewnych przeciwciał ze względu na brak drugiej fazy
aglutynacji - przeciwciała łączą się z antygenami na krwinkach
czerwonych i rutynowymi metodami laboratoryjnymi nie jesteśmy w
stanie tego zaobserwować.
Aktywność aglutynacyjną takich przeciwciał można wzmocnić poprzez
zastosowanie roztworów koloidowych / albumina, surowica ludzka /lub
poddając krwinki działaniu enzymów proteolitycznych /PAPAINA,
BROMELINA/.
temperatura 37 0 C.
Znalazła tu zastosowanie SUROWICA ANTYGLOBULINOWA I TEST
ANTYGLOBULINOWY . Jest to surowica przeciwko ludzkim
przeciwciałom uzyskiwana od zwierząt doświadczalnych lub metodami
biologii molekularnej. Pod jej wpływem zachodzi druga faza aglutynacji
co można zaobserwować makroskopowo.
Jest to optymalna temperatura NIEKOMPLETNYCH PRZECIWCIAŁ
ODPORNOŚCIOWYCH.
PODSUMOWANIE
Przeciwciała grupowe krwinek czerwonych
ALLOPRZECIWCIAŁA
Naturalne (IgM)
Odpornościowe (IgG)
regularne
-M, -N, -S, -D, -C, -c, -E,-e,-K,-k,
-P1, -Lea,-Leb
nieregularne
-Fya,-Fyb, -Jka, -Jkb,-s
kompletne
niekompletne
typu zimnego
typu ciepłego
Surowica antyglobulinowa
3
-A, -B
321172071.005.png 321172071.006.png 321172071.007.png
GŁÓWNE UKŁADY GRUPOWE
Serologiczna charakterystyka przeciwciał
klinicznie istotnych
Antygeny tworzą układy grupowe. Do układu grupowego
zalicza się antygeny, które są kodowane przez geny zajmujące
to samo miejsce w parze chromosomów. Do tej pory poznano
kilkaset antygenów, spośród których ponad 250 zalicza się do
23 układów grupowych. Tylko kilkanaście antygenów z tak dużej
liczby ma praktyczne zastosowanie w pracy serologa. Są to
antygeny, które ze względu na dużą immunogenność i rozkład w
populacji mogą być przyczyną reakcji poprzetoczeniowych oraz
mogą wywoływać chorobę hemolityczną noworodków.
•Aglutynacja lub hemoliza w 37 O C
•Swoistość : z układu ABO, RH,Kell, Kidd, Duffy, anty-s, anty-P
•Klasa Ig:
-IgM wiążące dopełniacz: anty-A; anty-B
-IgG z układu Rh, Kell, Kidd, Duffy
Fenotyp stanowią antygeny danego układu grupowego obecne u
osoby badanej i wykryte podczas badań serologicznych.
GŁÓWNE UKŁADY GRUPOWE
GŁÓWNE UKŁADY GRUPOWE
A. Układ AB0
A. Układ AB0
Układ grupowy AB0 został odkryty przez badacza wiedeńskiego
Karola Landsteinera w 1901 roku. Układ ten charakteryzuje się
obecnością dwóch rodzajów antygenów A i B. Kombinacja
obecności jednego albo drugiego antygenu, równoczesna obecność
lub brak obydwu antygenów stwarza możliwość istnienia czterech
grup krwi.
Odmiany antygenów - odmiany antygenu A są częstsze niż
odmiany antygenu B.
A 1 występuje u 80% populacji osób z grupą A i AB.
Pozostałe odmiany to A 2 i znacznie rzadsze A 3 , A x ,A m
A, B, AB, 0
GŁÓWNE UKŁADY GRUPOWE
GŁÓWNE UKŁADY GRUPOWE
A. Układ AB0
B. Układ Rh
Antygeny układu Rh zależne są od dwóch sprzężonych genów leżących
na krótszym ramieniu chromosomu 1. Jeden z genów koduje
antygen D, a drugi antygeny C,c,E,e. Do tej pory
zidentyfikowano na krwinkach czerwonych 49 antygenów
układu Rh.
Charakterystyczną cechą układu AB0 jest to, że w surowicy
danego osobnika są obecne przeciwciała skierowane przeciw
antygenowi nieobecnemu na jego własnych krwinkach - „Reguła
Landsteinera”
Grupa krwi
Antygen na
krwinkach
Alloprzeciwciała
w surowicy
Antygeny układu Rh znajdują się wyłącznie na krwinkach.
A
A
anty-B
W życiu płodowym pojawiają się wcześnie, około 8 tygodnia życia.
B
B
anty-A
W celu oznaczenia fenotypu Rh stosuje się pięć surowic: anty-C, anty-
c, anty-D, anty-E, anty-e.
AB
AB
-
0
0
anty-A i anty B
4
321172071.008.png
GŁÓWNE UKŁADY GRUPOWE
GŁÓWNE UKŁADY GRUPOWE
B. Układ Rh
ODMIANY I KATEGORIE ANTYGENU D.
Antygen D z układu Rh uważany jest za najbardziej immunogenny i
dlatego ludzi dzieli się na :
• Odmiany antygenu D charakteryzują się słabszą
reaktywnością krwinek czerwonych z surowicami
wzorcowymi Anty-D.
Rh+, którzy posiadają antygen D
Rh-, którzy nie posiadają antygenu D
•Słaby antygen D różni się od antygenu wykształconego
prawidłowo jedynie obniżoną ekspresją.
W Polsce antygen D występuje u około 82% osób.
• Osoby posiadające na swych krwinkach D słabe (dawniej
zwany D u ) są zaliczane do grupy Rh+ i jako biorcy
otrzymują krew dodatnią.
Oznaczając antygen D można zauważyć słabsze reakcje z niektórymi
surowicami anty-D. Należy to wiązać z istnieniem słabej odmiany
antygenu D.
GŁÓWNE UKŁADY GRUPOWE
GŁÓWNE UKŁADY GRUPOWE
ODMIANY I KATEGORIE ANTYGENU D.
D słabe najczęściej w rasie białej występuje z antygenami C lub E
CcDee
częstość 37%
• Odmiany antygenu D zdarzają się bardzo rzadko. Spośród
nich najczęściej rozpoznawaną jest kategoria D VI .
CCDee
częstość 17%
ccDEe
częstość 13%
• W praktyce rozpoznanie kategorii antygenu D dotyczy
najczęściej osób Rh dodatnich, u których wykryto
alloprzeciwciałaanty-D. Swoistość tych przeciwciał skierowana
jest do brakujących epitopów antygenu D na autologicznych
krwinkach.
ccDEE
częstość 2%
Ccdee
częstość 0,8%
ccDee
częstość 0,2%
ccdee
częstość 17%
• Osoby, u których wykryto kategorię D VI antygenu D zaliczane
są do grupy Rh- i do przetoczenia dobiera się im krew Rh
ujemną, a kobiety są objęte profilaktyką konfliktu Rh.
Przeciwciała tylko odpornościowe, niekompletne, ciepłe, klasy IgG
Najczęściej występują przeciwciała anty-D /u osób Rh-/
U osób Rh+ najczęściej przeciwciała anty –E / 51%/, anty-c /18%/
*częstości antygenów podane sądla obszaru Polski
GŁÓWNE UKŁADY GRUPOWE
GŁÓWNE UKŁADY GRUPOWE
C. Układ Kell
D. Układ Duffy
Antygeny: Fy a , Fy b
Fenotyp Fy(ab-) częstość 17% przeciwciała anty- Fy b
Fenotyp Fy(a+, b+) częstość 49%
Fenotyp Fy(a-, b+) częstość 34% przeciwciała anty- Fy a
Antygeny: K, k
Fenotyp KK częstość 0,2% przeciwciała anty-k
Fenotyp Kk częstość 9,5%
Fenotyp kk częstość 90,3% przeciwciała anty-K
Przeciwciała odpornościowe, niekompletne powodują
ciężkie hemolityczne powikłania poprzetoczeniowe. Często
choroba hemolityczna noworodków.
Przeciwciała odpornościowe, niekompletne, powodują
ciężkie hemolityczne powikłania poprzetoczeniowe.
Choroba hemolityczna noworodków w tym układzie zdarza
się bardzo rzadko
5
CcDEe
częstość 10%
ccdEe
częstość 3%
321172071.009.png
Zgłoś jeśli naruszono regulamin